PEG-6000 Induced Precipitation of Proteins from Cold-Acclimated Tenebrio molitor larvae
DOI:
https://doi.org/10.15407/cryo25.04.350Ключевые слова:
Ñ…Ð¾Ð»Ð¾Ð´Ð¾Ð²Ð°Ñ Ð°ÐºÐºÐ»Ð¸Ð¼Ð°Ñ†Ð¸Ñ, белки, полиÑтиленгликоль, преципитациÑ, ÑлектрофорезАннотация
Ð’ Ñравнительном аÑпекте иÑÑледованы Ñпектры преципитированных ПÐГ-6000 белков неакклимированных и акклимированных личинок Tenebrio molitor. Показано, что качеÑтвенный ÑоÑтав криопреципитированных белков акклимированных и неакклимированных личинок T. molitor имеет отличиÑ. Ð’ чаÑтноÑти, в белковых Ñпектрах фильтратов из акклимированных личинок поÑвлÑлиÑÑŒ белки Ñ Ð¼. м. 11 кДа, которые отÑутÑтвуют у неакклимированных наÑекомых. При преципитации белков из гомогенатов холодоакклимированных и неакклимированных личинок наблюдалаÑÑŒ Ð·Ð½Ð°Ñ‡Ð¸Ð¼Ð°Ñ Ñ€Ð°Ð·Ð½Ð¸Ñ†Ð° в количеÑтве преципитата при концентрациÑÑ… полиÑÑ‚Ð¸Ð»ÐµÐ½Ð³Ð»Ð¸ÐºÐ¾Ð»Ñ 12% и более. Белки из фильтратов акклимированных ли-чинок в приÑутÑтвии 6%-го раÑтвора ПÐГ-6000 оÑаждалиÑÑŒ на 44 и 56% больше, чем белки из неакклимированных оÑобей при 22 и 4°С ÑоответÑтвенно. Увеличение концентрации ПÐГ-6000 от 4 до 6% приводило к поÑвлению в преципитатах из акклимованных личинок белков в диапазоне м. м. 30–42,5 кДа, которые отÑутÑтвуют в неакклимированных наÑекомых.
Библиографические ссылки
Aghajari N., Feller G., Gerday C. et al. Structures of the psychrophilic Alteromonas haloplanctis a-amylase give insights into cold adaptation at a molecular level. Structure 1998; 6 (12): 1503–1516. CrossRef
Alvarez M., Zeelen J.P., Mainfroid V. et al. Triose-phosphate isomerase (TIM) of the psychrophilic bacterium Vibrio marinus. Kinetic and structural properties. J Biol Chem 1998; 273 (4): 2199–2206. CrossRef PubMed
Arnоrsdоttir J., Smaradоttir R.B., Magnusson O. et al. Characterization of a cloned subtilisin-like serine proteinase from a psychrotrophic Vibrio species. Eur J Biochem 2002; 269 (22): 5536–5546. CrossRef
Ciardiello M.A., Camardella L., Carratore V. et al. L-glutamate dehydrogenase from the antarctic fish Chaenocephalus aceratus. Primary structure, function and thermodynamic characterisation: relationship with cold adaptation. Biochim Biophys Acta 2000; 1543 (1): 11–23. CrossRef
Bhat R., Timasheff S.N. Steric exclusion is the principal source of the preferential hydration of proteins in the presence of polyethylene glycols. Protein Science 1992; 1: 1133–1143. CrossRef PubMed
Fields P.A., Houseman D.E. Decreases in аctivation еnergy and substrate affinity in cold-adapted A4-lactate dehydrogenase: evidence from the Antarctic notothenioid fish Chaeno-cephalus aceratus. Mol Biol Evol 2004; 21 (12): 2246–2255. CrossRef PubMed
Gulevsky A.K., Ryazantsev V.V., Grischenkova Ye.A., Relina L.I. Changes in protein composition of mealworms (Tenebrio molitor) during cold acclimation. Problems of Cryobiology 1995; (4): 29–32.
Korolevskaya L.B., Shmagel K.V. Spectroturbidimetric deter-mination of serum aggregates formed in polyethylene glycol. Immunologiya 2010; 31 (2): 108–111.
Liou Y.C., Daley M.E., Graham L.A. et al. Folding and structural characterization of highly disulfide-bonded beetle antifreeze protein produced in bacteria. Protein Expr Purif 2000; 19 (1): 148–157. CrossRef PubMed
Marshall C.B., Daley M.E., Graham L.A. et al. Identification of the ice-binding face of antifreeze protein from Tenebrio molitor. FEBS Lett 2002; 529 (2–3): 261–267. CrossRef
Osterman L.A. Methods of investigating proteins and nucleic acids: Electrophoresis and ultracentrifugation. Moscow, Nauka; 1981.
Paithankar K. R., Prasad K. S. Precipitation of DNA by polyethylene glycol and ethanol. Nucleic Acids Res 1991; 19 (6): 1346.
Peng J., Xia Z., Chen L. et al. Rapid and efficient isolation of high-quality small RNAs from recalcitrant plant species rich in polyphenols and polysaccharides. PLoS ONE 2014; 9 (5): e95687. CrossRef PubMed
Rizzello Ð., Romano A., Kottrab G. et al. Protein cold adaptation strategy via a unique seven-amino acid domain in the icefish (Chionodraco hamatus) PEPT1 transporter. PNAS 2013; 110 (17): 7068–7073. CrossRef PubMed
Qin W., Walker V.K. Tenebrio molitor antifreeze protein gene identification and regulation. Gene 2006; 367: 142–149. CrossRef PubMed
Scopes R. Methods of protein purification. Moscow, Mir; 1985.
Shulgin I.L., Ruckenstein E. Preferential hydration and solubility of proteins in aqueous solutions of polyethylene glycol. Biophysical Chemistry 2006; 120: 188–198. CrossRef PubMed
Yakhontov V.V. Pests of agricultural plants and products of Central Asia and actions against them. Tashkent, Gosizdat UzSSR; 1953.
Zhangyong He., Ying Zhu., Hongchen Gu. A new method for the determination of critical polyethylene glycol concentration for selective precipitation of DNA fragments. Applied Micro-biology and Biotechnology 2013; 97 (20): 9175–9183. CrossRef PubMed
Загрузки
Опубликован
Как цитировать
Выпуск
Раздел
Лицензия
Copyright (c) 2020 Aleksandr K. Gulevsky, Elena O. Grischenkova, Liana I. Relina, Diana V. Tretyak
![Лицензия Creative Commons](http://i.creativecommons.org/l/by/4.0/88x31.png)
Это произведение доступно по лицензии Creative Commons «Attribution» («Атрибуция») 4.0 Всемирная.
Авторы, публикующие в данном журнале, соглашаются со следующим:
- Авторы сохраняют за собой авторские права на работу и предоставляют журналу право первой публикации работы на условиях лицензии Creative Commons Attribution License, которая позволяет другим распространять данную работу с обязательным сохранением ссылок на авторов оригинальной работы и оригинальную публикацию в этом журнале.
- Авторы сохраняют право заключать отдельные контрактные договоренности, касающиеся не-эксклюзивного распространения версии работы в опубликованном здесь виде (например, размещение ее в институтском хранилище, публикацию в книге), со ссылкой на ее оригинальную публикацию в этом журнале.
- Авторы имеют право размещать их работу в сети Интернет (например в институтском хранилище или персональном сайте) до и во время процесса рассмотрения ее данным журналом, так как это может привести к продуктивному обсуждению и большему количеству ссылок на данную работу (См. The Effect of Open Access).