PEG-6000 Induced Precipitation of Proteins from Cold-Acclimated Tenebrio molitor larvae

Авторы

  • Aleksandr K. Gulevsky Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
  • Elena O. Grischenkova Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
  • Liana I. Relina Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
  • Diana V. Tretyak Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

DOI:

https://doi.org/10.15407/cryo25.04.350

Ключевые слова:

холодовая акклимация, белки, полиэтиленгликоль, преципитация, электрофорез

Аннотация

Ð’ Ñравнительном аÑпекте иÑÑледованы Ñпектры преципитированных ПЭГ-6000 белков неакклимированных и акклимированных личинок Tenebrio molitor. Показано, что качеÑтвенный ÑоÑтав криопреципитированных белков акклимированных и неакклимированных личинок T. molitor имеет отличиÑ. Ð’ чаÑтноÑти, в белковых Ñпектрах фильтратов из акклимированных личинок поÑвлÑлиÑÑŒ белки Ñ Ð¼. м. 11 кДа, которые отÑутÑтвуют у неакклимированных наÑекомых. При преципитации белков из гомогенатов холодоакклимированных и неакклимированных личинок наблюдалаÑÑŒ Ð·Ð½Ð°Ñ‡Ð¸Ð¼Ð°Ñ Ñ€Ð°Ð·Ð½Ð¸Ñ†Ð° в количеÑтве преципитата при концентрациÑÑ… полиÑÑ‚Ð¸Ð»ÐµÐ½Ð³Ð»Ð¸ÐºÐ¾Ð»Ñ 12% и более. Белки из фильтратов акклимированных ли-чинок в приÑутÑтвии 6%-го раÑтвора ПЭГ-6000 оÑаждалиÑÑŒ на 44 и 56% больше, чем белки из неакклимированных оÑобей при 22 и 4°С ÑоответÑтвенно. Увеличение концентрации ПЭГ-6000 от 4 до 6% приводило к поÑвлению в преципитатах из акклимованных личинок белков в диапазоне м. м. 30–42,5 кДа, которые отÑутÑтвуют в неакклимированных наÑекомых.

Биографии авторов

Aleksandr K. Gulevsky, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

Отдел биохимии холодовой адаптации

Elena O. Grischenkova, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

Отдел биохимии холодовой адаптации

Liana I. Relina, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

Отдел биохимии холодовой адаптации

Diana V. Tretyak, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков

Отдел биохимии холодовой адаптации

Библиографические ссылки

Aghajari N., Feller G., Gerday C. et al. Structures of the psychrophilic Alteromonas haloplanctis a-amylase give insights into cold adaptation at a molecular level. Structure 1998; 6 (12): 1503–1516. CrossRef

Alvarez M., Zeelen J.P., Mainfroid V. et al. Triose-phosphate isomerase (TIM) of the psychrophilic bacterium Vibrio marinus. Kinetic and structural properties. J Biol Chem 1998; 273 (4): 2199–2206. CrossRef PubMed

Arnоrsdоttir J., Smaradоttir R.B., Magnusson O. et al. Characterization of a cloned subtilisin-like serine proteinase from a psychrotrophic Vibrio species. Eur J Biochem 2002; 269 (22): 5536–5546. CrossRef

Ciardiello M.A., Camardella L., Carratore V. et al. L-glutamate dehydrogenase from the antarctic fish Chaenocephalus aceratus. Primary structure, function and thermodynamic characterisation: relationship with cold adaptation. Biochim Biophys Acta 2000; 1543 (1): 11–23. CrossRef

Bhat R., Timasheff S.N. Steric exclusion is the principal source of the preferential hydration of proteins in the presence of polyethylene glycols. Protein Science 1992; 1: 1133–1143. CrossRef PubMed

Fields P.A., Houseman D.E. Decreases in аctivation еnergy and substrate affinity in cold-adapted A4-lactate dehydrogenase: evidence from the Antarctic notothenioid fish Chaeno-cephalus aceratus. Mol Biol Evol 2004; 21 (12): 2246–2255. CrossRef PubMed

Gulevsky A.K., Ryazantsev V.V., Grischenkova Ye.A., Relina L.I. Changes in protein composition of mealworms (Tenebrio molitor) during cold acclimation. Problems of Cryobiology 1995; (4): 29–32.

Korolevskaya L.B., Shmagel K.V. Spectroturbidimetric deter-mination of serum aggregates formed in polyethylene glycol. Immunologiya 2010; 31 (2): 108–111.

Liou Y.C., Daley M.E., Graham L.A. et al. Folding and structural characterization of highly disulfide-bonded beetle antifreeze protein produced in bacteria. Protein Expr Purif 2000; 19 (1): 148–157. CrossRef PubMed

Marshall C.B., Daley M.E., Graham L.A. et al. Identification of the ice-binding face of antifreeze protein from Tenebrio molitor. FEBS Lett 2002; 529 (2–3): 261–267. CrossRef

Osterman L.A. Methods of investigating proteins and nucleic acids: Electrophoresis and ultracentrifugation. Moscow, Nauka; 1981.

Paithankar K. R., Prasad K. S. Precipitation of DNA by polyethylene glycol and ethanol. Nucleic Acids Res 1991; 19 (6): 1346.

CrossRef

Peng J., Xia Z., Chen L. et al. Rapid and efficient isolation of high-quality small RNAs from recalcitrant plant species rich in polyphenols and polysaccharides. PLoS ONE 2014; 9 (5): e95687. CrossRef PubMed

Rizzello Ð., Romano A., Kottrab G. et al. Protein cold adaptation strategy via a unique seven-amino acid domain in the icefish (Chionodraco hamatus) PEPT1 transporter. PNAS 2013; 110 (17): 7068–7073. CrossRef PubMed

Qin W., Walker V.K. Tenebrio molitor antifreeze protein gene identification and regulation. Gene 2006; 367: 142–149. CrossRef PubMed

Scopes R. Methods of protein purification. Moscow, Mir; 1985.

Shulgin I.L., Ruckenstein E. Preferential hydration and solubility of proteins in aqueous solutions of polyethylene glycol. Biophysical Chemistry 2006; 120: 188–198. CrossRef PubMed

Yakhontov V.V. Pests of agricultural plants and products of Central Asia and actions against them. Tashkent, Gosizdat UzSSR; 1953.

Zhangyong He., Ying Zhu., Hongchen Gu. A new method for the determination of critical polyethylene glycol concentration for selective precipitation of DNA fragments. Applied Micro-biology and Biotechnology 2013; 97 (20): 9175–9183. CrossRef PubMed

Загрузки

Опубликован

2015-12-21

Как цитировать

Gulevsky, A. K., Grischenkova, E. O., Relina, L. I., & Tretyak, D. V. (2015). PEG-6000 Induced Precipitation of Proteins from Cold-Acclimated Tenebrio molitor larvae. Проблемы криобиологии и криомедицины, 25(4), 350–358. https://doi.org/10.15407/cryo25.04.350

Выпуск

Раздел

Теоретическая и экспериментальная криобиология