Вплив кріоконÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð½Ð° екÑпреÑÑ–ÑŽ хромогранину A в культурі клітин наднирників неонатальних Ñвиней
DOI:
https://doi.org/10.15407/cryo29.04.344Ключові слова:
культура клітин надниркових залоз, мультиклітинні Ñфероїди, хромогранін Ð, кріоконÑервуваннÑ, хромафінні клітиниАнотація
ДоÑліджено екÑпреÑÑ–ÑŽ хромограніну Ð (ХрÐ) в хромафінних клітинах наднирників новонароджених пороÑÑÑ‚ піÑÐ»Ñ ÐºÑ€Ñ–Ð¾ÐºÐ¾Ð½ÑервуваннÑ. Фрагменти тканини наднирників кріоконÑервували з викориÑтаннÑм 10% диметилÑульфокÑиду Ñ– контрольованої швидкоÑÑ‚Ñ– Ð¾Ñ…Ð¾Ð»Ð¾Ð´Ð¶ÐµÐ½Ð½Ñ 1 град/хв до –80°С з подальшим зануреннÑм в рідкий азот. У ÑкоÑÑ‚Ñ– інтактного контролю викориÑтовували незаморожені фрагменти. Ферментативним методом з фрагментів отримували ÑуÑпензію клітин, Ñку поміщали в умови культивуваннÑ. Культури клітин з інтактних Ñ– кріоконÑервованих фрагментів ÑвлÑли Ñобою моношар з прикріпленими на ньому мультиклітинними Ñфероїдами (МС). Методом цитофлуориметрії з викориÑтаннÑм антитіл до ХрРвÑта-новлено, що кількіÑÑ‚ÑŒ ХрÐ-позитивних клітин в кріоконÑервованих зразках значуще не відрізнÑєтьÑÑ Ð²Ñ–Ð´ контролю ((31,1 ± 2,7) Ñ– (32,9 ± 3,6)% відповідно). Імуноцитохімічним методом в обох культурах на початкову добу ÐºÑƒÐ»ÑŒÑ‚Ð¸Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð²Ð¸Ñвлені ХрÐ-позитивні клітини Ñк у Ñкладі моношару, так Ñ– в МС. ПротÑгом ÐºÑƒÐ»ÑŒÑ‚Ð¸Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ ÐºÑ–Ð»ÑŒÐºÑ–ÑÑ‚ÑŒ цих клітин значуще не відрізнÑлаÑÑ, однак вони перерозподілÑлиÑÑ: зменшувавÑÑ Ð²Ð¼Ñ–ÑÑ‚ у моношарі, але збільшувавÑÑ Ñƒ МС. Схожі кількіÑÑ‚ÑŒ клітин із екÑпреÑією ХрРта характер Ñ—Ñ… розподілу в обох культурах Ñвідчать про те, що кріоконÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ñ„Ñ€Ð°Ð³Ð¼ÐµÐ½Ñ‚Ñ–Ð² наднирників у викориÑтаному режимі зберігає оÑновні Ñтруктурно-функціональні влаÑтивоÑÑ‚Ñ– хромафінних клітин.
Â
Probl Cryobiol Cryomed 2019; 29(4): XXX–XXX
Посилання
Bondarenko TP, Legach EI, Kiroshka VV, et al. [Cultivation, cryopreservation and tissue transplantation of endocrine glands]. In: Goltsev AN, editor. [Actual problems of cryobiology and cryomedicine]. Kharkiv: IPCC; 2012. p. 361-401. Russian.
Bozhok GA, Sidorenko OS, Plaksina EM, et al. Neural differentiation potential of sympathoadrenal progenitors derived from fresh and cryopreserved neonatal porcine adrenal glands. Cryobiology. 2016; 73(2): 152-61. CrossRef
Chung KF, Sicard F, Vukicevic V, et al. Isolation of neural crest derived chromaffin progenitors from adult adrenal medulla. Stem Cells. 2009; 27(10): 2602-13. CrossRef
Elias S, Delestre C, Ory S, et al. Chromogranin A induces the biogenesis of granules with calcium- and actin-dependent dynamics and exocytosis in constitutively secreting cells. Endocrinology. 2012; 153(9): 4444-56. CrossRef
Fuller B, Lane N, Benson E, editors. Life in the frozen state. New York: CRC Press; 2004. 663 p. CrossRef
Gkolfinopoulos S, Tsapakidis K, Papadimitriou K, et al. Chromogranin A as a valid marker in oncology: clinical application or false hopes. World J Methodol. 2017; 7(1):9-15. CrossRef
Huber K. The sympathoadrenal cell lineage: specification, diversification, and new perspectives. Dev Biol. 2006; 298(2): 335-43. CrossRef
Kent C, Coupland RE. Localisation of chromogranin A and B, met-enkephalin-arg6-gly7-leu8 and PGP9.5-like immunoreactivity in the developing and adult rat adrenal medulla and extra-adrenal chromaffin tissue. J Anat. 1989;16(6): 213-25. PubMed
Livett BG, Borges R. Advances in cell culture for chromaffin cells and related cell types. In: Borges R, Gandia L, editors. Cell biology of the chromaffin cell. La Laguna, Madrid: Instituto Teófilo Hernando; 2004. p. 261-7.
Marotta V, Zatelli MC, Sciammarella C, et al. Chromogranin A as circulating marker for diagnosis and management of neuroendocrine neoplasms: more flaws than fame. Endocr Relat Cancer. 2018; 25(1): R11-R29. CrossRef
Plaksina EM, Sidorenko OS, Bozhok GA. Cryopreservation of multicellular spheroids derived from newborn piglet adrenal glands. Probl Cryobiol Cryomed. 2017; 27: 322-33. CrossRef
Plaksina EM, Sidorenko OS, Legach YeI, et al. [Expression of β-III-tubulin in neonatal adrenal cell culture: comparison of monolayer and 3D cultivation]. The Journal of V.N. Karazin Kharkiv National University. Series "Biology". 2017; 28: 76-86. Russian. CrossRef
Santana MM, Chung KF, Vukicevic V, et al. Isolation, characterization and differentiation of progenitor cells from human adult adrenal medulla. Stem Cells Transl. Med. 2012; 1(11): 783-91. CrossRef
Saxena S, Wahl J, Huber-Lang MS, et al. Generation of murine sympathoadrenergic progenitor-like cells from embryonic stem cells and postnatal adrenal glands. PLoS ONE [Internet]. 2013 May [cited10.10.2019]; 8(5): e64454. Available from: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0064454 CrossRef
Sidorenko OS, Bozhok GA, Bilavskaya SB, et al. [Morphological and functional characteristics of the culture of adrenal gland cells of newborn piglets.] Biotechnology 2012; 5 (5): 72-81. Russian.
Sidorenko OS, Bozhok GA, Legach EI, et al. [Obtaining primary culture of adrenal cells of newborn piglets]. Medytsyna Sogodni i Zavtra. 2011; 1(2): 248-52. Russian.
Sidorenko OS, Bozhok GA, Legach EI, et al. The study of the possibility of obtaining and cryopreservation of the primary culture of adrenal cells of newborn piglets. Problems of Cryobiology. 2011; 21(1): 58- 67.
Unsicker K, Müller TH. Purification of bovine adrenal chromaffin cells by differential plating. J Neurosci Methods. 1981; 4(3): 227-41. CrossRef
Xu ZQ, Lew JY, Harada K, et al. Immunohistochemical studies on phosphorylation of tyrosine hydroxylase in central catecholamine neurons using site-and phosphorylation state-specific antibodies. Neuroscience. 1998; 82(3): 72-38. CrossRef
Yoo SH, Huh YH, Hur YS. Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor in chromaffin secretory granules and its relation to chromogranins. Cell Mol Neurobiol. 2010; 30:115-61. CrossRef
Downloads
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
