Антиоксидант тролокс як фактор стабілізації ядровмісних клітин кордової крові людини при кріоконсервуванні
DOI:
https://doi.org/10.15407/cryo33.02.122Ключові слова:
ядровмісні клітини кордової крові, кріоконсервування, диметилсульфоксид, тролокс, стадії апоптозуАнотація
У роботі представлено експериментальні дані з визначення збереженості та стадій апоптозу/некрозу ядровмісних клітин кордової крові людини з метою встановлення кількості живих функціонально активних клітин після кріоконсервування в розчинах із різною концентрацією ДМСО та водорозчинного аналога вітаміну Е — антиоксиданта тролоксу. Підрахунок кількості ядровмісних клітин кордової крові людини після заморожування в середовищах із додаванням тролоксу показав максимальну їхню збереженість у пробах з 7,5% ДМСО та 50, 70 або 200 мкМ антиоксиданта. Методом протокової цитофлуориметрії з додаванням реагенту Annexin V FITC, який специфічно зв’язується з фосфоліпідами, та ДНК барвника 7-аміно-актиноміцину D (7-AAD) встановлено, що тролокс у концентраціях 50–70 мкМ забезпечує збільшення кількості живих клітин з неушкодженою мембраною (AnnexinV─/7AAD─) на 12–16% у порівнянні з контролем — використання в кріопротекторному розчині тільки ДМСО. Отримані результати вказують на ефективність застосування антиоксиданта тролоксу та перспективність розробки тролоксвмісних кріопротекторних сумішей для заморожування та довгострокового зберігання ядровмісних, у тому числі гемопоетичних прогеніторних, клітин кордової крові.
Probl Cryobiol Cryomed 2023; 33(2):122-132
Посилання
Babijchuk LO, Gryschenko VI, Gurina TM, etc., inventors; Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of NAS of Ukraine, assignee. [The technique of cryopreservation for cord blood nucleated cells, including hematopoietic stem cells]. Ukraine patent № 92227. 2010 Oct 11. Ukrainian.
Baishya SK, Biswas RK, Govindasamy K, et al. Effect of reduced glutathione, water soluble vitamin E analogue and butylated hydroxytoluene on the post thaw characteristics of boar spermatozoa. CryoLetters. 2018; 39(4): 227-34. PubMed
Ballen KK, Gluckman E, Broxmeyer HE. Umbilical cord blood transplantation: the first 25 years and beyond. Blood. 2013; 122(4): 491-8. CrossRef
Davis JM, editor. Basic cell culture. A practical approach. Oxford: Oxford University Press; 2002. 382p.
Donaldson C, Armitage WJ, Denning-Kendall PA, et al. Optimal cryopreservation of human umbilical cord blood. Bone Marrow Transplant. 1996; 18(4): 725-73. PubMed
Giordano ME, Caricato R, Lionetto MG. Concentration dependence of the antioxidant and prooxidant activity of Trolox in HeLa cells: involvement in the induction of apoptotic volume decrease. Antioxidants [Internet]. 2020 Oct 29 [cited 2022 Sept 19]; 9(11): 1058. Available from: https://www.mdpi.com/2076-3921/9/11/1058 CrossRef
Ha SJ, Kim BG, Lee YA, et al. Effect of antioxidants and apoptosis inhibitors on cryopreservation of murine germ cells enriched for spermatogonial stem cells. PLoS One [Internet]. 2016 Aug 22 [cited 2022 Sept 12]; 11(8): e0161372. Available from: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0161372 CrossRef
Kekre N, Antin JH. Hematopoietic stem cell transplantation donor sources in the 21st century: choosing the ideal donor when a perfect match does not exist. Blood. 2014; 124(3): 334-43. CrossRef
Massey KD, Burton KP. Free radical damage in neonatal rat cardiac myocyte cultures: effects of alpha-tocopherol, Trolox and phytol. Free Radic Biol Med. 1990; 8(5): 449-58. CrossRef
Minaei M, Barbarestani M, Nekoonam S, et al. Effect of Trolox addition to cryopreservation media on human sperm motility. Iran J Reprod Med. 2012; 10(2): 99-104. PubMed
Murugesan M, Nair CK, Nayanar SK, Pentapati KC. Flow cytometric enumeration of CD34+ hematopoietic stem cells: A comparison between single- versus dual-platform methodology using the ISHAGE protocol. Asian J Transfus Sci. 2019; 13(1): 43-6. CrossRef
Oram JF, Wolfbauer G, Vaughan AM, et al. Phospholipid transfer protein interacts with and stabilizes ATP-binding cassette transporter A1 and enhances cholesterol efflux from cells. J Biol Chem. 2003; 278(52): 52379-85. CrossRef
Ray PD, Huang BW, Tsuji Y. Reactive oxygen species homeostasis and redox regulation in cellular signaling. Cell Signal. 2012; 24(5): 981-90. CrossRef
Rocha V, Gluckman E. Eurocord-Netcord registry and European blood and marrow transplant group. Improving outcomes of cord blood transplantation: HLA matching, cell dose and other graft- and transplantation-related factors. Br J Haematology. 2009; 147(2): 262-74. CrossRef
Varo-Ghiuru F, Miclea I, Hettig A, et al. Lutein, trolox, ascorbic acid and combination of trolox with ascorbic acid can improve boar semen quality during cryopreservation. CryoLetters. 2015; 36(1): 1-7. PubMed
Vermes I, Haanen C, Steffens-Nakken H, Reutelingsperger C. A novel assay for apoptosis. Flow cytometric detection of phosphatidylserine expression on early apoptotic cells using fluorescein labelled annexin. J Immunol Methods. 1995; 184(1): 39-51. CrossRef
Downloads
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
