Ультраструктурні та функціональні характеристики сперміїв людини після кріоконсервування методом вітрифікації

Автор(и)

  • Olena Pavlovych Інститут проблем кріобіології Ñ– кріомедицини НАН України, м. Харків
  • Hanna Hapon Інститут проблем кріобіології Ñ– кріомедицини НАН України, м. Харків
  • Taisiia Yurchuk Інститут проблем кріобіології Ñ– кріомедицини НАН України, м. Харків
  • Mykola Repin Інститут проблем кріобіології Ñ– кріо-медицини НАН України, м. Харків
  • Larysa Marchenko Інститут проблем кріобіології Ñ– кріомедицини НАН України, м. Харків
  • Tetiana Govorukha Інститут проблем кріобіології Ñ– кріомедицини НАН України, м. Харків
  • Maryna Petrushko Інститут проблем кріобіології Ñ– кріомедицини НАН України, м. Харків

DOI:

https://doi.org/10.15407/cryo30.01.024

Ключові слова:

сперматозоїди, кріоконсервування, вітрифікація, полівінілпіролідон, астенозооспермія

Анотація

Низькотемпературне консервування сперматозоїдів широко використовується при лікуванні безпліддя методами допоміжних репродуктивних технологій (ДРТ). Методи кріоконсервування сперматозоїдів із еякулятів при нормозооспермії є рутинними, проте їх неможливо використовувати для сперматозоїдів, отриманих із еякулятів при вадах сперматогенезу. Розробка методів кріоконсервування та оцінка морфофункціональних та ультраструктурних характеристик сперматозоїдів після кріоконсервування є актуальними. У роботі оцінювали вплив кріоконсервування методом вітрифікації з використанням непроникальних кріопротекторів полівінілпіролідону (ПВП) та сахарози на морфофункціональний та ультра-структурний стан сперматозоїдів людини при патоспермії. У (22,3 ± 3,4), (26,8 ± 4,2), (18,6 ± 2,1)% сперміїв після вітрифікації з 0,25 М сахарозою; 10% ПВП та сумішшю 0,25 М сахарози, 10% ПВП, 10% сироваткового альбуміну людини відповідно, спостерігали виникнення вакуолей у хроматині ядер сперматозоїдів. Для свіжовиділених сперматозоїдів цей показник становив (16,6 ± 1,4)%. У досліджувальних групах ультраструктурні характеристики акросоми, аксонеми, периаксонемальних структур та джгутика сперматозоїдів суттєво не відрізнялися від контрольних зразків. Показано, що кріоконсервування сперматозоїдів людини методом вітрифікації з використанням розчинів сахарози та ПВП дозволяє зберегти їх життєздатність та ультраструктурну цілісність та є перспективним для використання у ДРТ.

Probl Cryobiol Cryomed 2020; 30(1): 024–033

Біографії авторів

Olena Pavlovych , Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Відділ кріобіології ÑиÑтеми репродукції

Hanna Hapon , Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Відділ кріобіології ÑиÑтеми репродукції

Taisiia Yurchuk , Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Відділ кріобіології ÑиÑтеми репродукції

Mykola Repin , Інститут проблем кріобіології і кріо-медицини НАН України, м. Харків

Ð›Ð°Ð±Ð¾Ñ€Ð°Ñ‚Ð¾Ñ€Ñ–Ñ ÐºÑ€Ñ–Ð¾Ð¼Ð¾Ñ€Ñ„Ð¾Ð»Ð¾Ð³Ñ–Ñ—

Larysa Marchenko , Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Ð›Ð°Ð±Ð¾Ñ€Ð°Ñ‚Ð¾Ñ€Ñ–Ñ ÐºÑ€Ñ–Ð¾Ð¼Ð¾Ñ€Ñ„Ð¾Ð»Ð¾Ð³Ñ–Ñ—

Tetiana Govorukha , Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Ð›Ð°Ð±Ð¾Ñ€Ð°Ñ‚Ð¾Ñ€Ñ–Ñ ÐºÑ€Ñ–Ð¾Ð¼Ð¾Ñ€Ñ„Ð¾Ð»Ð¾Ð³Ñ–Ñ—

Maryna Petrushko , Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Відділ кріобіології ÑиÑтеми репродукції

Посилання

Afzelius B. Electron microscopy of the sperm tail results obtained with a new fixative. J Bioph Biochem Cytol. 1959;5(2):269-78. CrossRef

Aizpurua J, Medrano L, Enciso M et al. New permeable cryoprotectant-free vitrification method for native human sperm. Hum Reprod. 2017;32(10):2007-15. CrossRef

Bragina EE, Sorokina TM, Arifulin EA, Kurilo LF. [Genetically determined patozoospermia.] Moscow: SOPEK-polygrapfia. 2002. 93 p. Russian.

Chemes HE, Rawe VY. The making of abnormal spermatozoa: cellular and molecular mechanisms underlying pathological spermiogenesis. Cell Tissue Res. 2010;341(3):349-57. CrossRef

Chohan KR, Griffin JT, Carrell DT. Evaluation of chromatin integrity in human sperm using acridine orange staining with different fixatives and after cryopreservation. Androl. 2004;36(5):321-6. CrossRef

Conklin B, Richter E, Kreutziger K et al. Development and evaluation of a novel decellularized vascular xenograft. Med Eng Physics. 2002;24(3):173-83. CrossRef

Isachenko V, Isachenko E, Petrunkina AM, Sánchez R. Human spermatozoa vitrified in the absence of permeable cryoprotectants: birth of two healthy babies. Reprod Fertil. 2012;24(2):323-6. CrossRef

Isachenko V, Isachenko E, Katkov I, et al. Cryoprotectant-free cryopreservation of human spermatozoa by vitrification and freezing in vapor: effect on motility, DNA integrity, and fertilization ability. Biol Reprod. 2004;71(4):1167-73. CrossRef

Isachenko V, Maettner R, Petrunkina AM, et al. Cryoprotectant free vitrification of human spermatozoa in large (to 0.5 mL) volume: novel technology. Clin Lab. 2011;57(9-10):643-50. PubMed

Isachenko EP, Mallmann G, Rahimi J, et al. Vitrification technique-new possibilities for male gamete low-temperature storage. In: Katkov II, editor. Current Frontiers in Cryobiology. InTech Open Access Books; 2012. Chapter 1; p. 41-76. [Cited 01.03.2019]. Available from: https://www.intechopen.com/books/current-frontiers-in-cryobiology/vitrification-of-fish-and-dog-spermatozoa. CrossRef

Fahy GM, Levy DI, Ali SE. Some emerging principles underlying the physical properties, biological actions, and utility of vitrification solutions. Cryobiology. 1987,24(3):196-213. CrossRef

Khayat SSh, Bragina EE, Kurilo LF. [Ultrastructural investigation of human sperm from asthenozoospermic men.] J Andr Genit Surg. 2012,13(4):54-61. Russian.

Mohamed MSA. Slow cryopreservation is not superior to vitrification in human spermatozoa; an experimental controlled study. Int J Reprod Med. 2015;13(10):633-44. PubMed

Nawroth F, Isachenko V, Dessole S et al. Vitrification of human spermatozoa without cryoprotectants. CryoLetters. 2002,23(2):93-102. PubMed

Ozkavukcu S, Erdemli E, Isik A, et al. Effects of cryopreservation on sperm parameters and ultrastructural morphology of human spermatozoa. J Assist Reprod Genet. 2008; 25(8): 403-11. CrossRef

Petrushko MP. [Сurrent state of cryopreservation of reproductive cells and embryos.] Visn Nac Akad Nauk Ukr. 2017;(7):44-52. Ukrainian. CrossRef

Petrushko MP The cytogenetic analysis of unfertilized human oocytes. Tsitol Genet. 2003;37(6): 60-5.

Petrushko МP, Pavlovich EV, Pinyaev VІ et al. Apoptosis and processes of DNA fragmentation in native and cryopreserved human sperm cells at normo- and pathospermia. Tsitol Genet. 2017, 51(4): 278-81. CrossRef

Repin NV, Marchenko LN, Govorukha TP, Mikhailova IP, Manchenko AA, Sandomirsky BP. Ultrastructure of porcine pericardium and aortic valve tissues, devitalized with cryogenic and irradiation exposures. Probl Cryobiol Cryomed. 2015,25(3):246-54. CrossRef

Virant-Klun I, Tomazevic T, Meden-Vrtovec H. Sperm single-stranded DNA, detected by acridine orange staining, reduces fertilization and quality of ICSI-derived embryos. J Assist Reprod Genet. 2002,19(7):319-28. CrossRef

WHO laboratory manual for the Examination and processing of human semen. Fifth edition. World Health Organization, Department of Reproductive Health and Research. 2010. 287p.

Zheng WW, Song G, Wang QL, et al. Sperm DNA damage has a negative effect on early embryonic development following in vitro fertilization. Asian J Androl. 2018;20(1):75-9. CrossRef

Downloads

Опубліковано

2020-03-28

Як цитувати

Pavlovych , O., Hapon , H., Yurchuk , T., Repin , M., Marchenko , L., Govorukha , T., & Petrushko , M. (2020). Ультраструктурні та функціональні характеристики сперміїв людини після кріоконсервування методом вітрифікації. Проблеми кріобіології і кріомедицини, 30(1), 24–33. https://doi.org/10.15407/cryo30.01.024

Номер

Розділ

Теоретична та експериментальна кріобіологія