Кріоконсервування культури клітин, отриманої зі спінальних гангліїв неонатальних поросят
DOI:
https://doi.org/10.15407/cryo30.02.158Ключові слова:
кріоконÑервуваннÑ, культура клітин, Ñпінальні ганглії, Ñателітні гліоцити, диметилÑульфокÑид, глутамінÑинтетазаАнотація
У роботі доÑліджували вплив кріоконÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð· різними концентраціÑми диметилÑульфокÑиду (ДМСО) на морфофункціональні влаÑтивоÑÑ‚Ñ– культури клітин зі Ñпінальних гангліїв (ККСГ). Клітини отримували зі Ñпінальних гангліїв неонатальних пороÑÑÑ‚ Ñ– культивували протÑгом 7 діб у живильному Ñередовищі α-МЕМ з 10% фетальної телÑчої Ñироватки (ФТС). За даних умов ÑпоÑтерігаєтьÑÑ Ð¿ÐµÑ€ÐµÐ²Ð°Ð¶Ð½Ð¸Ð¹ ріÑÑ‚ мантійних гліоцитів (МГ). Отриману культуру кріоконÑервували на етапі 1 зі швидкіÑÑ‚ÑŽ 0,5 град/хв до –20°С, на етапі 2 – 1 град/хв до –80°С, піÑÐ»Ñ Ñ‡Ð¾Ð³Ð¾ зразки занурювали у рідкий азот. ВикориÑтовували кріозахиÑні розчини на оÑнові Ñередовища α-МЕМ, 25% ФТС та ДМСО в кінцевих концентраціÑÑ… 5, 7,5 та 10%. ПіÑÐ»Ñ Ð²Ñ–Ð´Ñ–Ð³Ñ€Ñ–Ð²Ñƒ на 10-ту добу ÑÑƒÐ±ÐºÑƒÐ»ÑŒÑ‚Ð¸Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð¾Ñ†Ñ–Ð½ÑŽÐ²Ð°Ð»Ð¸ життєздатніÑÑ‚ÑŒ клітин, відноÑну площу моношару та екÑпреÑÑ–ÑŽ глутамінÑинтетази Ñк маркера МГ. Ð’Ñтановлено, що кріоконÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ ÐšÐšÐ¡Ð“ з викориÑтаннÑм 7,5% ДМСО забезпечує піÑÐ»Ñ Ð²Ñ–Ð´Ñ–Ð³Ñ€Ñ–Ð²Ñƒ 87,7% життєздатних клітин та 85% відноÑної площі моношару від інтактного контролю. КількіÑÑ‚ÑŒ МГ Ñтановила близько 95%. Одержані результати дозволÑÑŽÑ‚ÑŒ рекомендувати обраний режим Ð´Ð»Ñ Ð½Ð¸Ð·ÑŒÐºÐ¾Ñ‚ÐµÐ¼Ð¿ÐµÑ€Ð°Ñ‚ÑƒÑ€Ð½Ð¾Ð³Ð¾ Ð·Ð±ÐµÑ€Ñ–Ð³Ð°Ð½Ð½Ñ ÐºÑƒÐ»ÑŒÑ‚ÑƒÑ€ клітин, збагачених МГ.
Probl Cryobiol Cryomed 2020; 30(2): 158–168
Â
Посилання
Ali SG, Sidorenko OS, Bozhok GA. Influence of nutrient medium composition on the morphological characteristics of culture of dorsal root ganglion cells of neonatal piglets. The Journal of V. N. Karazin Kharkiv National University. Series "Biology". 2018; 30: 49-59. CrossRef
Arora DK, Cosgrave AS, Howard MR et al. Evidence of postnatal neurogenesis in dorsal root ganglion: role of nitric oxide and neuronal restrictive silencer transcription factor. Journal of Molecular Neuroscience. 2007; 32 (2): 97-107. CrossRef
Belzer V, Shraer N, Hanani M. Phenotypic changes in satellite glial cells in cultured trigeminal ganglia. Neuron Glia Biol. 2010; 6 (4): 237-43. CrossRef
Capuano A, De Corato A, Lisi L, et al. Proinflammatory-activated trigeminal satellite cells promote neuronal sensitization: relevance for migraine pathology. Molecular Pain. 2009; 5:43. CrossRef
de Luca AC, Faroni A, Reid AJ. Dorsal root ganglia neurons and differentiated adipose-derived stem cells: An in vitro co-culture model to study peripheral nerve regeneration. J Vis Exp. 2015; 96: e52543. [Cited 02.05.2019]. Available from: https://www.jove.com/video/52543/dorsal-root-ganglia-neurons-differentiated-adipose-derived-stem-cells CrossRef
Feldman-Goriachnik R, Wu B, Hanani M. Cholinergic responses of satellite glial cells in the superior cervical ganglia. Neurosci Lett. 2018; 671: 19-24. CrossRef
Fernandes MR, Pedroso AR. Animal experimentation: A look into ethics, welfare and alternative methods. Rev Assoc Med Bras [Internet]. 2017 Nov [cited 2019 June 20]; 63(11): 923-8. Available from: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0104-42302017001100923&lng=en CrossRef
Hornberger K, Yu G, McKenna D, et al. Cryopreservation of hematopoietic stem cells: Emerging assays, cryoprotectant agents, and technology to improve outcomes. Transfus Med Hemother. 2019; 46 (3): 188-96. CrossRef
Humphray SJ, Scott CE, Clark R, et al. A high utility integrated map of the pig genome. Genome Biology. 2007; 8 (7): R139. CrossRef
Li HY, Say EH, Zhou XF. Isolation and characterization of neural crest progenitors from adult dorsal root ganglia. Stem Cells. 2007; 25 (8): 2053-65. CrossRef
Lin YT, Chen JC. Dorsal Root Ganglia Isolation and Primary Culture to Study Neurotransmitter Release. J Vis Exp [Internet]. 2018 [cited 02.05.2019]; 140: e57569. Available from: https://www.jove.com/video/57569/dorsal-root-ganglia-isolation-primary-culture-to-study CrossRef
Malin SA, Davis BM, Molliver DC. Production of dissociated sensory neuron cultures and considerations for their use in studying neuronal function and plasticity. Nat Protoc. 2007; 2 (1): 152-60. CrossRef
Meller K. The reaggregation of neurons and their satellite cells in cultures of trypsin-dissociated spinal ganglia. Cell Tiss. Res. 1974; 152 (2): 175-83. CrossRef
Miller KE, Richards BA, Kriebel RM. Glutamine-, glutaminesynthetase-, glutamate dehydrogenase- and pyruvate carboxylaseimmunoreactivities in the rat dorsal root ganglion and peripheral nerve. Brain Res. 2002; 945 (2): 202-11. CrossRef
Nagoshi N, Shibata S, Kubota Y, et al. Ontogeny and multipotency of neural crest-derived stem cells in mouse bone marrow, dorsal root ganglia, and whisker pad. Cell Stem Cell. 2008; 2 (4): 392-403. CrossRef
Ogawa R, Fujita K, Ito K. Mouse embryonic dorsal root ganglia contain pluripotent stem cells that show features similar to embryonic stem cells and induced pluripotent stem cells. Biol Open. 2017; 6 (5): 602-18. CrossRef
Ohara PT, Vit JP, Bhargava A, et al. Gliopathic pain: when satellite glial cells go bad. Neuroscientist. 2009; 15 (5): 450-63. CrossRef
Plaksina EM, Sidorenko OS, Legach ЕI, et al. [Expression of ß-III-tubulin in the neonatal adrenal cell culture: comparison of monolayer and 3D-culture]. The Journal of V. N. Karazin Kharkiv National University. Series "Biology". 2018; 28: 76-86. Russian. CrossRef
Poulsen JN, Larsen F, Duroux M, et al. Primary culture of trigeminal satellite glial cells: a cell-based platform to study morphology and function of peripheral glia. Int J Physiol Pathophysiol Pharmacol. 2014; 6 (1): 1-12.
Schwarz S, Spitzbarth I, Baumgärtner W, Lehmbecker A. Cryopreservation of canine primary dorsal root ganglion neurons and its impact upon susceptibility to paramyxovirus infection. Int J Mol Sci [Internet]. 2019 Feb 28 [cited 02.05.2019]; 20 (5): 1058. Available from: https://www.mdpi.com/1422-0067/20/5/1058 CrossRef
Seggio AM, Ellison KS, Hynd MR, et al. Cryopreservation of transfected primary dorsal root ganglia neurons. J Neurosci Methods. 2008; 173 (1): 67-73. CrossRef
Singh RP, Cheng YH, Nelson P, et al. Retentive multipotency of adult dorsal root ganglia stem cells. Cell Transplant. 2009; 18 (1): 55-68. CrossRef
Smith RA, McInnes IB. Phase contrast and electron microscopical observations of adult mouse dorsal root ganglion cells maintained in primary culture. J Anat. 1986; 145:1-12.
Svenningsen A, Colman DR, Pedraza L. Satellite cells of dorsal root ganglia are multipotential glial precursors. Fex Neuron Glia Biol. 2004; 1 (1): 85-93. CrossRef
Takeda M, Takahashi M, Matsumoto S. Contribution of the activation of satellite glia in sensory ganglia to pathological pain. Neurosci Biobehav Rev. 2009; 33 (6): 784-92. CrossRef
Wang XB, Ma W, Luo T, et al. A novel primary culture method for high-purity satellite glial cells derived from rat dorsal root ganglion. Neural Regen Res. 2019; 14 (2): 339-45. CrossRef
Downloads
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Авторське право (c) 2020 Sabina G. Ali, Natalia M. Moiseieva, Galina A . Bozhok
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
