Вплив кріозахисних розчинів на метаболічну активність культури клітин Chlorococcum dіssectum та Dunaliella salina

Автор(и)

  • Krystyna Vozovyk Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків
  • Nadiia Chernobai Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків https://orcid.org/0000-0002-5736-9277
  • Nataliya Kadnikova Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків https://orcid.org/0000-0002-5728-6498
  • Nadiia Shevchenko Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків https://orcid.org/0000-0001-6794-1444

DOI:

https://doi.org/10.15407/cryo33.01.014

Ключові слова:

кріоконсервування, мікроводорості, кріозахисні розчини, токсичність, метаболічна активність

Анотація

Розробка протоколів кріоконсервування мікроводоростей Chlorococcum dіssectum Korshikov та Dunaliella salina Teodoresco потребує підбору ефективних кріопротекторів та їхніх концентрацій. Одним з етапів вибору оптимальних концентрацій кріопротекторів є визначення ступеня токсичності для клітин на етапі еквілібрації. У роботі використовували розчини диметилсульфоксиду, етиленгліколю, етилового спирту, гліцерину (5–30%), модифікованого PVS1 та PVS2 (50 і 75%). Вплив кріозахисних сполук визначали за тестом відновлення резазурину. Найменший пошкоджувальний вплив на клітини Ch. dissectum чинив 10%-й розчин гліцерину. Обробка зразків розчинами етанолу і диметилсульфоксиду зменшувала метаболічну активність на 31–33%, етиленгліколю ― на 50%. Інкубація у 75%-му модифікованому PVS1 та 50 і 75%-х розчинах PVS2 знижувала метаболічну активність більш ніж удвічі порівняно з контролем. Найбільш токсичним кріопротектором для культури D. salina виявився етиловий спирт. Експозиція клітин у розчинах диметилсульфоксиду, етиленгліколю та гліцерину зменшувала метаболічну активність на 25%. Інкубація клітин D. salina у PVS не впливала на досліджуваний показник.

 

Probl Cryobiol Cryomed 2023; 33(1):014–024

Біографії авторів

Krystyna Vozovyk, Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Лабораторія фітокріобіології

Nadiia Chernobai, Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Лабораторія фітокріобіології

Nataliya Kadnikova, Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Лабораторія фітокріобіології

Nadiia Shevchenko, Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків

Лабораторія фітокріобіології

Посилання

Adeniyi OM, Azimov U, Burluka A. Algae biofuel: current status and future applications. Renew Sustain Energy Rev. 2018; 90:316-35. CrossRef

Al-Rikabey MN, Al-Mayah AM. Cultivation of Chlorella vulgaris in BG-11 media using Taguchi method. J Adv Res Dynamic. 2018; 10(7): 19-30.

Amenorfenyo DK, Huang X, Zhang Y, et al. Microalgae brewery wastewater treatment: potentials, benefi ts and the challenges. Int J Environ Res Public Health [Internet]. 2019 May 30 [Cited 30.11.22]; 16(11): 1910. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6603649/ CrossRef

Best BP. Cryoprotectant toxicity: facts, issues, and questions. Rejuvenation Res. 2015; 18(5): 422-36. CrossRef

Bhattacharya S. Cryoprotectants and their usage in cryopreservation process. In: Bozkurt Y, editor. Cryopreservation biotechnology in biomedical and biological sciences [Internet]. 2018 Nov 5 [Cited 2022 Oct 23]. Available from: https://www.intechopen.com/chapters/64165 CrossRef

Borowitzka MA. Biology of microalgae. In: Levine IA, Fleurence J, editors. Microalgae in health and disease prevention. Netherlands: Elsevier; 2018. р. 23-72. CrossRef

Cheregi O, Ekendahl S, Engelbrektsson J, et al. Microalgae biotechnology in nordic countries - the potential of local strains. Physiol Plant. 2019; 166(1): 438-50. CrossRef

Chernobai N, Kadnikova N, Kovalenko I. The role of cold adaptation in cryopreservation of Dunaliella salina Teod. microalgae. Adv Biol Earth Sci. 2019; 4(2): 119-27.

Chernobai NA, Vozovik KD, Kadnikova NG. Comparative analysis of methods for assessing the safety of Dunaliella salina Teodoresco and Chlorococcum dissectum Korshikov (Chlorophyta) microalgae cultures after exposure to stress factors. Algologia. 2021; 31(4): 353-64. CrossRef

Day J, Benson E, Harding K, et al. Cryopreservation and conservation of microalgae: the development of a pan-european scientific and biotechnological resource (the COBRA project). CryoLetters. 2005; 26(4): 231-8. PubMed

Gäbler-Schwarz S, Rad Menendez C, Achilles-Day U, et al. Cryopreservation of Phaeocystis antarctica. CryoLetters. 2013;34(6): 561-70. PubMed

Gangl D, Zedler JA, Rajakumar PD, et al. Biotechnological exploitation of microalgae. J Exp Bot. 2015; 66 (22): 6975-90. CrossRef

Heesch S, Day JG, Yamagishi T, et al. Cryopreservation of the model alga Ectocarpus (Phaeophyceae). CryoLetters. 2012; 33: 327-336. PubMed

Hosseini Tafreshi A, Shariati M. Dunaliella biotechnology: methods and applications. J Appl Microbiol. 2009; 107(1): 14-35. CrossRef

Hubálek Z. Protectants used in the cryopreservation of microorganisms. Cryobiology. 2003; 46 (3): 205-29. CrossRef

Ramaraj S, Niran J. Modified medium for enhanced growth of Dunaliella strains. Int J Curr Sci. 2013; (5): 67-73.

Shevchenko N, Kovalenko G, Kovalenko I, Stribul T. Discovery of osmotic responses of sweet potato meristems in cryoprotective solutions. Probl Cryobiol Cryomed. 2021; 31(2): 180-4. CrossRef

Tsukazaki H, Mii M, Tokuhara K, Ishikawa K. Cryopreservation of Doritaenopsis suspension culture by vitrification. Plant Cell Rep. 2000; 19 (12): 1160-4. CrossRef

Wang B, Zhang Z, Yin Z, et al. Novel and potential application of cryopreservation to plant genetic transformation. Biotechnol Adv. 2012; 30(3): 604-12. CrossRef

Zamecnik J, Faltus M, Bilavcik A. Vitrification solutions for plant cryopreservation: modification and properties. Plants [Internet]. 29 Nov 2021 [Cited 30.11.22]; 10(12): 2623. Available from: https://www.mdpi.com/2223-7747/10/12/2623 CrossRef

Downloads

Опубліковано

2023-06-14

Як цитувати

Vozovyk, K., Chernobai, N., Kadnikova, N., & Shevchenko, N. (2023). Вплив кріозахисних розчинів на метаболічну активність культури клітин Chlorococcum dіssectum та Dunaliella salina. Проблеми кріобіології і кріомедицини, 33(1), 014–024. https://doi.org/10.15407/cryo33.01.014

Номер

Розділ

Теоретична та експериментальна кріобіологія