Моделювання осмотичної поведінки клітин під час охолодження та кристалізації води
Ключові слова:
швидкість охолодження, нуклеація, модель Кедема-Качальського, безсироваткові середовища, декстран, диметилсульфоксид, клітини інтерстицію сім’яника, кріоконсервуванняАнотація
Для успішного збереження клітинних суспензій важливим є визначення такого параметра кріоконсервування, як швидкість охолодження. Метою цього дослідження було оцінити вплив швидкості охолодження та нуклеації на виживаність інтерстиціальних клітин (ІК) сім’яника, а також змоделювати осмотичну поведінку клітин на основі формалізму Кедема–Качальського під час кристалізації води. Клітини інтерстицію охолоджували в безсироватковому середовищі, який містив 0,7 М ДМСО та 100 мг/мл декстрану 40 (0,7ДМСО + Д40). Моделювання осмотичної поведінки КІ у середовищі, яке засноване на експериментально визначених показниках мембранної проникності для води та ДМСО і відповідних енергіях активації, показало потенційну можливість підвищення швидкості охолодження порівняно зі «стандартною» 1 °C/хв. Цю можливість було перевірено експериментально із застосуванням вищих швидкостей охолодження — 2, 5 та 10 °C/хв. Було показано, що швидкість охолодження 2 °C/хв у поєднанні з контрольованими параметрами нуклеації є сприятливою для збереження КІ у середовищі з декстраном і ДМСО. Підхід, який включає моделювання, використання хімічно визначених безсироваткових композицій, контрольовану нуклеацію та оптимізацію швидкостей охолодження, може бути застосований до кріоконсервування інших типів клітин у розчинах із хімічно визначеним станом.
Probl Cryobiol Cryomed. 2026; 36(2): 79—88
Посилання
Akhoondi M, Oldenhof H, Sieme H, Wolkers WF. Freezing-induced cellular and membrane dehydration in the presence of cryoprotective agents. Mol Membr Biol. 2012; 29(6): 197-206. CrossRef
Costanzo JP, Grenot C, Lee RE Jr. Supercooling, ice inoculation and freeze tolerance in the European common lizard, Lacerta vivipara. J Comp Physiol B. 1995; 165(3) :238-44. CrossRef
Cudd A, Arvinte T, Schulz B, Nicolau C. Dextran protection of erythrocytes from low-pH-induced hemolysis. FEBS Lett. 1989; 250(2): 293-6. CrossRef
Daily MI, Whale TF, Partanen R, et al. Cryopreservation of primary cultures of mammalian somatic cells in 96-well plates benefits from control of ice nucleation. Cryobiology. 2020; 93: 62-9. CrossRef
Deng B, Bondarenko T, Pakhomov O. Changes in sexual behavior of orchidectomized rats under influence of allotransplantation of testicular interstitial cell suspension. Cell Transplant. 2017; 26(5): 795-803. CrossRef
Dokras A, Sargent IL, Redman CW, Barlow DH. Sera from women with unexplained infertility inhibit both mouse and human embryo growth in vitro. Fertil Steril. 1993; 60(2): 285-92. CrossRef
Fernández ML, Reigada R. Effects of dimethyl sulfoxide on lipid membrane electroporation. J Phys Chem B. 2014; 118(31): 9306-12. CrossRef
Gordienko YeA, Pushkar NS. [Physical grounds of low temperature preservation of cell suspensions]. Kyiv: Naukova dumka; 1994. 143 р. Russian.
Gurina TM, Pakhomov AV, Bozhok GA. Effect of cooling rate under various temperature intervals on survival of steroidogenic potential of suspension of interstitial cells of adult rat testes. Problems of Cryobiology. 2007; 17(4): 394-402. Full Text
Gurina TM, Pakhomov AV, Kyryliuk AL, Bozhok GA. Development of a cryopreservation protocol for testicular interstitial cells with the account of temperature intervals for controlled cooling below -60°С. Cryobiology. 2011;62(2): 107-14. CrossRef
Hinckley GT, Johnson CJ, Jacobson KH, et al. Persistence of pathogenic prion protein during simulated wastewater treatment processes. Environ Sci Technol. 2008; 42(14): 5254-9. CrossRef
Hughes ZE, Mark AE, Mancera RL. Molecular dynamics simulations of the interactions of DMSO with DPPC and DOPC phospholipid membranes. J Phys Chem B. 2012; 116(39): 11911-23. CrossRef
Kedem O, Katchalsky A. Thermodynamic analysis of the permeability of biological membranes to non-electrolytes. Biochim Biophys Acta. 1958; 27(2): 229-46. CrossRef
Léveillé MC, Carnegie J, Tanphaichitr N. Effects of human sera and human serum albumin on mouse embryo culture. J Assist Reprod Genet. 1992; 9(1): 45-52. CrossRef
Mazur P, Leibo SP, Chu EH. A two-factor hypothesis of freezing injury. Evidence from Chinese hamster tissue-culture cells. Exp Cell Res. 1972; 71(2): 345-55. CrossRef
Morris GJ, Acton E. Controlled ice nucleation in cryopreservation - A review. Cryobiology. 2013; 66(2): 85-92. CrossRef
Pakhomov AV, Bozhok GA, Gurina TM. Study of steroidogenic potential of post-thaw biological material of mature rat testes. Problems of Cryobiology. 2009; 19(1): 63-70. Full Text
Pakhomov O, Gurina T, Mazaeva V, et al. Phase transitions and mechanisms of cryoprotection of serum-/xeno-free media based on dextran and dimethyl sulfoxide. Cryobiology. 2022; 107: 13-22. CrossRef
Pakhomov OV, Gurina TM, Polyakova AL, et al. Study of physical processes occurring in serum-containing and polymer-based serum-free cryoprotective media. Biopolym Cell. 2024; 40(1): 37-46. CrossRef
Pakhomov O, Kovalenko I, Chernobai N. Modeling cell osmotic behavior for improvement of cryopreservation protocol. Probl Cryobiol Cryomed. 2025; 35(4): 196-209. CrossRef
Pakhomov OV, Legach EI, Protsenko OS, et al. Contribution of extracellular solute transfer to testicular cell damage. Regul Mech Biosyst. 2024 15(4): 728-32. CrossRef
Pakhomov O, Posokhov Y. Detecting changes of testicular interstitial cell membranes with a fluorescent probe after incubation and cryopreservation with cryoprotective agents. Cryobiology [Internet]. 2025 Jan 6 [cited 2025 Jun 6]; 118: 105194. Available from: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0011224024003493 CrossRef
Pakhomov O, Posokhov Y, Volkova N, et al. Effects of cryoprotective agents on osmotic tolerance limit of testicular interstitial cells. Bioph Bull. 2025; (53): 18-33. CrossRef
Pakhomov O, Shevchenko N, Chernobai N, et al. Open-source hardware- and software-based cryomicroscopy system for investigation of phase transitions in cryobiological research. J Microsc. 2024 Feb; 293(2): 71-85. CrossRef
Stéphenne X, Najimi M, Sokal EM. Hepatocyte cryopreservation: is it time to change the strategy? World J Gastroenterol. 2010; 16(1): 1-14. CrossRef
Tarusin DN, Kireyev VA, Kovalenko SY, et al. Selection of protocols to cryopreserve mesenchymal stromal cells in suspension and alginate microspheres by studying their osmotic responses in 1M DMSO. Probl Cryobiol Cryomed. 2016; 26(2): 133-44. CrossRef
Todrin AF, Popivnenko LI, Kovalenko SY. Thermophysical properties of cryoprotectants. I. Temperature and heat of melting. Problems of Cryobiology. 2009; 19(2): 163-76. Full Text
Traversari G, Delogu F, Aparicio S, Cincotti A. hMSCs in contact with DMSO for cryopreservation: Experiments and modeling of osmotic injury and cytotoxic effect. Biotechnology and Bioengineering. 2022; 119(10): 2890-907. CrossRef
Ware CB, Nelson AM, Anthony Blau C. Controlled-rate freezing of human ES cells. BioTechniques. 2005; 38(6): 879-83. CrossRef
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
