Криоконсервирование эритроцитов лошади и быка с применением комбинированных защитных сред

Авторы

  • Pavlo Yu. Ulizko Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков
  • Olena M Bobrova Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков
  • Oleg A Nardid 1. Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков 2. Харьковский национальный университет имени Ð’.Н. Каразина
  • Pavlo Ðœ. Zubov Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков
  • Igor F. Kovalenko Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков
  • Vadim M. Kuchkov Харьковский национальный университет имени Ð’.Н. Каразина
  • Larisa A. Vodopyanova Харьковская государственная зооветеринарная академия

DOI:

https://doi.org/10.15407/cryo29.03.255

Ключевые слова:

Краниоцеребральная гипотермия, иммерсионная гипотермия, ритмические холодовые воздействия, экстремальные холодовые воздействия, лейкоциты, интегральные лейкоцитарные индексы, крысы

Аннотация

Ð’ работе проведен Ñравнительный анализ ÑффективноÑти криоконÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ñритроцитов ÐºÐ¾Ð½Ñ Ð¸ быка Ñ Ð¿Ñ€Ð¸Ð¼ÐµÐ½ÐµÐ½Ð¸ÐµÐ¼ однокомпонентной (20% ДМСО) и комбинированной (10% ДМСО, 20% ПЭО-1500) защитных Ñред. Методами флуореÑцентной микроÑкопии и проточной цитофлуориметрии уÑтановлено, что флуореÑцентный краÑитель 3-DAB окрашивает мембраны Ñритроцитов и может применÑÑ‚ÑŒÑÑ Ð´Ð»Ñ Ð¾Ñ†ÐµÐ½ÐºÐ¸ их ÑоÑтоÑÐ½Ð¸Ñ Ð½Ð° вÑех Ñтапах криоконÑервированиÑ. Ð’Ñ‹Ñвлено, что применение комбинированных защитных Ñред позволÑет значительно улучшить результаты криоконÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ñритроцитов ÐºÐ¾Ð½Ñ Ð¸ быка по Ñравнению Ñ Ð¾Ð´Ð½Ð¾ÐºÐ¾Ð¼Ð¿Ð¾Ð½ÐµÐ½Ñ‚Ð½Ñ‹Ð¼Ð¸ Ñредами. По цитофлуориметричным данным уÑтановлено, что показатели Ñритроцитов ÐºÐ¾Ð½Ñ Ð¿Ð¾Ñле конÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð² Ñреде на оÑнове ДМСО не ÑоответÑтвовали контрольным, даже поÑле Ð¾Ñ‚Ð¼Ñ‹Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð¾Ñ‚ криопротектора, а поÑле Ð·Ð°Ð¼Ð¾Ñ€Ð°Ð¶Ð¸Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð² комбинированной криозащитной Ñреде и Ð¾Ñ‚Ð¼Ñ‹Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð¾Ñ‚ криопротекторов они ÑоответÑтвовали контрольным. УÑиление флуореÑценции Ñритроцитов лошади и быка на флуореÑцентных изображениÑÑ… и Ð¸Ð·Ð¼ÐµÐ½ÐµÐ½Ð¸Ñ Ð½Ð° цитограммах поÑле ÑÐ¼ÐµÑˆÐ¸Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ ÐºÐ»ÐµÑ‚Ð¾Ðº Ñ 20% ДМСО говорит о его Ñильном мембранотропном дейÑтвии. Уровень гемолиза Ñритроцитов ÐºÐ¾Ð½Ñ Ð¸ быка поÑле Ð¿Ñ€Ð¸Ð¼ÐµÐ½ÐµÐ½Ð¸Ñ ÐºÐ¾Ð¼Ð±Ð¸Ð½Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð½Ð¾Ð¹ криозащитной Ñреды на вÑех Ñтапах криоконÑÐµÑ€Ð²Ð¸Ñ€Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ Ð´Ð¾Ñтоверно ниже, чем 20%-го раÑтвора ДМСО.

 

Биографии авторов

Pavlo Yu. Ulizko, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков

Отдел криобиофизики

Olena M Bobrova, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков

Отдел криобиофизики

Oleg A Nardid, 1. Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков 2. Харьковский национальный университет имени В.Н. Каразина

Отдел криобиофизики

Pavlo М. Zubov, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков

Отдел криоцитологии

Igor F. Kovalenko, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины г. Харьков

Отдел низкотемпературного конÑервированиÑ

Библиографические ссылки

Anchordoguy TJ, Carpenter JF, Crowe JH, et al. Temperature dependent perturbation of phospholipids-bilayers by dimethylsulfoxide. Biochim Biophys Acta. 1992; 1104(1): 117-22. CrossRef

Baskurt OK, Farley RA, Meiselman HJ. Erythrocyte aggregation tendency and cellular properties in horse, human, and rat: a comparative study. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 1997; 273(6):H2604-H2612. [Cited 01.07.2019] Available from: https://www.physiology.org/journal/ajpheart CrossRef

Best BP. Cryoprotectant Toxicity: Facts, Issues, and Questions. Rejuvenation Research. 2015; 18(5):422-36. [Cited 01.07.2019] Available from: https://www.liebertpub.com/loi/rej CrossRef

Buriak IA, Zinchenko VD, Dyubko TS, et al. Application of new fluorescent dyes in cryobiological studies. Problems of Cryobiology. 2008; 18(1): 17-21.

Denisova ON, Kuleshova LG, Zemlyanskikh NG, et al. Postthaw morphological changes in animal erythrocytes. Problems of Cryobiology. 2007; 17(2): 150-5.

Denisova ON, Zhegunov GF, Babijchuk LA. Cryopreservation of animal's erythrocytes under dimethyl sulfoxide, polyethylene oxide and glycerol protection. Problems of Cryobiology. 2005; 15(2): 195-201.

Еgorov MI, Dyubko TS, Linnik TP, et al. New fluorescent dyes as fluorescent probes for examination of canine spermatozoa in cryoprotective media. Problems of Cryobiology. 2006. 16(1): 13-23.

Elliott GD, Wang S, Fuller BJ. Cryoprotectants: A review of the actions and applications of cryoprotective solutes that modulate cell recovery from ultra-low temperatures. Cryobiology. 2017; 76:74-91. CrossRef

Holowaychuk MK, Yagi K. Evolution of veterinary transfusion medicine and blood banking. Manual of Veterinary Transfusion Medicine and Blood Banking. 2016 1:1-12. CrossRef

Keeble E, Meredith A, Richardson J, editors. Rabbit medicine and surgery. Veterinary Self-Assessment Color Review Series. Boca Raton: CRC Press, 2016. 243 p. CrossRef

Mair T, Divers T. Equine Internal Medicine. Veterinary selfassessment color review series. Boca Raton: CRC Press; 2015. 399 p. CrossRef

Pogozhykh D, Pakhomova Y, Pervushina O, et al. Exploring the possibility of cryopreservation of feline and canine erythrocytes by rapid freezing with penetrating and non-penetrating cryoprotectants. Stieger K, editor. PLOS ONE. 2017; 12(1): e0169689. [Cited 08.08.2019] Available from: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0169689 CrossRef

Sink C. Practical Transfusion medicine for the small animal practitioner. Jackson: Teton NewMedia, 2004. 110 p.

Ulizko PU, Bobrova OM, Nardid EO, et al. Cryopreservation of animals′ erythrocytes. In: European Research Area: Status, Problems and Prospects. Proceedings of the International Academic Congress; Sept 01–02 2016, Riga, Latvia. Riga; 2016. p. 13–5.

Ulizko PY, Zhegunov GF, Bobrova OM, Zinchenko AV. Influence of mixtures of cryoprotective on safety of cryopreservation of erythrocyte of mammals. Bulletin of problems in biology and medicine. 2011; 3(3): 26-9. Russian.

Won DI, Suh JS. Flow cytometric detection of erythrocyte osmotic fragility. Cytometry Part B: Clin Cytom. 2009;76(2):135-41. CrossRef

Yagi K, Holowaychuk M. Manual of veterinary transfusion medicine and blood banking. Ames: Wiley-Blackwell, 2016. 382 p. CrossRef

Yamamoto A, Saito N, Yamauchi Y, et al. Flow cytometric analysis of red blood cell osmotic fragility. Journal of Laboratory Automation. 2014; 19(5):483-7. [Cited 01.07.2019] Available from: https://journals.sagepub.com/home/jla CrossRef

Zemlianskykh NG, Kovalenko IF, Babijchuk LA. Peculiarities of modifications in geometric parameters and changes in osmotic fragility of human erythrocytes following their exposure in sucrose and PEG-1500 Solutions. Problems of Cryobiology and Cryomedicine. 2017; 27(4): 296-310. CrossRef

Zubov PM. Altered lipid asymmetry of membranes of red blood cells of cord and donor blood under Cryopreservation with PEG-1500. Bulletin of problems in biology and medicine. 2013; 2(2): 109-112. Russian.

Загрузки

Опубликован

2019-09-19

Как цитировать

Ulizko, P. Y., Bobrova, O. M., Nardid, O. A., Zubov, P. Ðœ., Kovalenko, I. F., Kuchkov, V. M., & Vodopyanova, L. A. (2019). Криоконсервирование эритроцитов лошади и быка с применением комбинированных защитных сред. Проблемы криобиологии и криомедицины, 29(3), 255–265. https://doi.org/10.15407/cryo29.03.255

Выпуск

Раздел

Криоконсервирование биологических систем