КріоконÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ ÐµÑ€Ð¸Ñ‚Ñ€Ð¾Ñ†Ð¸Ñ‚Ñ–Ð² ÐºÐ¾Ð½Ñ Ñ– бика із заÑтоÑуваннÑм комбінованих захиÑних Ñередовищ
DOI:
https://doi.org/10.15407/cryo29.03.255Ключові слова:
кріоконÑервуваннÑ, еритроцити ÐºÐ¾Ð½Ñ Ñ– бика, комбіновані кріоконÑервуючі Ñередовища, гемоліз, флуореÑцентний барвникАнотація
У роботі проведено порівнÑльний аналіз ефективноÑÑ‚Ñ– кріоконÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ ÐµÑ€Ð¸Ñ‚Ñ€Ð¾Ñ†Ð¸Ñ‚Ñ–Ð² ÐºÐ¾Ð½Ñ Ñ– бика з заÑтоÑуваннÑм однокомпонентного (20% ДМСО) Ñ– комбінованого (10% ДМСО, 20% ПЕО-1500) захиÑних Ñередовищ. Методами флуореÑцентної мікроÑкопії та проточної цитофлуориметрії вÑтановлено, що флуореÑцентний барвник 3-DAB забарвлює мембрани еритроцитів Ñ– може заÑтоÑовуватиÑÑ Ð´Ð»Ñ Ð¾Ñ†Ñ–Ð½ÐºÐ¸ Ñ—Ñ… Ñтану на вÑÑ–Ñ… етапах кріоконÑервуваннÑ. ВиÑвлено, що викориÑÑ‚Ð°Ð½Ð½Ñ ÐºÐ¾Ð¼Ð±Ñ–Ð½Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¸Ñ… захиÑних Ñередовищ дозволÑÑ” значно покращити результати кріоконÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ ÐµÑ€Ð¸Ñ‚Ñ€Ð¾Ñ†Ð¸Ñ‚Ñ–Ð² ÐºÐ¾Ð½Ñ Ñ– бика у порівнÑнні з однокомпонентними Ñередовищами. За цитофлуориметричними даними вÑтановлено, що показники еритроцитів ÐºÐ¾Ð½Ñ Ð¿Ñ–ÑÐ»Ñ ÐºÐ¾Ð½ÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ñƒ Ñередовищі на оÑнові ДМСО не відповідали контрольним, навіть піÑÐ»Ñ Ð²Ñ–Ð´Ð¼Ð¸Ð²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð²Ñ–Ð´ кріопротектора, а піÑÐ»Ñ Ð·Ð°Ð¼Ð¾Ñ€Ð¾Ð¶ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ñƒ комбінованому захиÑному Ñередовищі Ñ– Ð²Ñ–Ð´Ð¼Ð¸Ð²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð²Ñ–Ð´ кріопротекторів вони відповідали контрольним. ПоÑÐ¸Ð»ÐµÐ½Ð½Ñ Ñ„Ð»ÑƒÐ¾Ñ€ÐµÑценції еритроцитів ÐºÐ¾Ð½Ñ Ñ– бика на флуореÑцентних зображеннÑÑ… та зміни Ñ—Ñ… Ñтану на цитограмах піÑÐ»Ñ Ð·Ð¼Ñ–ÑˆÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð· 20%-м розчином ДМСО Ñвідчать про його потужну мембранотропну дію. Рівень гемолізу еритроцитів ÐºÐ¾Ð½Ñ Ñ– бика піÑÐ»Ñ Ð·Ð°ÑтоÑÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ ÐºÐ¾Ð¼Ð±Ñ–Ð½Ð¾Ð²Ð°Ð½Ð¾Ð³Ð¾ кріозахиÑного Ñередовища на вÑÑ–Ñ… етапах кріоконÑÐµÑ€Ð²ÑƒÐ²Ð°Ð½Ð½Ñ Ð·Ð½Ð°Ñ‡ÑƒÑ‰Ðµ нижчий, ніж 20%-го розчину ДМСО.
Â
Посилання
Anchordoguy TJ, Carpenter JF, Crowe JH, et al. Temperature dependent perturbation of phospholipids-bilayers by dimethylsulfoxide. Biochim Biophys Acta. 1992; 1104(1): 117-22. CrossRef
Baskurt OK, Farley RA, Meiselman HJ. Erythrocyte aggregation tendency and cellular properties in horse, human, and rat: a comparative study. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 1997; 273(6):H2604-H2612. [Cited 01.07.2019] Available from: https://www.physiology.org/journal/ajpheart CrossRef
Best BP. Cryoprotectant Toxicity: Facts, Issues, and Questions. Rejuvenation Research. 2015; 18(5):422-36. [Cited 01.07.2019] Available from: https://www.liebertpub.com/loi/rej CrossRef
Buriak IA, Zinchenko VD, Dyubko TS, et al. Application of new fluorescent dyes in cryobiological studies. Problems of Cryobiology. 2008; 18(1): 17-21.
Denisova ON, Kuleshova LG, Zemlyanskikh NG, et al. Postthaw morphological changes in animal erythrocytes. Problems of Cryobiology. 2007; 17(2): 150-5.
Denisova ON, Zhegunov GF, Babijchuk LA. Cryopreservation of animal's erythrocytes under dimethyl sulfoxide, polyethylene oxide and glycerol protection. Problems of Cryobiology. 2005; 15(2): 195-201.
Еgorov MI, Dyubko TS, Linnik TP, et al. New fluorescent dyes as fluorescent probes for examination of canine spermatozoa in cryoprotective media. Problems of Cryobiology. 2006. 16(1): 13-23.
Elliott GD, Wang S, Fuller BJ. Cryoprotectants: A review of the actions and applications of cryoprotective solutes that modulate cell recovery from ultra-low temperatures. Cryobiology. 2017; 76:74-91. CrossRef
Holowaychuk MK, Yagi K. Evolution of veterinary transfusion medicine and blood banking. Manual of Veterinary Transfusion Medicine and Blood Banking. 2016 1:1-12. CrossRef
Keeble E, Meredith A, Richardson J, editors. Rabbit medicine and surgery. Veterinary Self-Assessment Color Review Series. Boca Raton: CRC Press, 2016. 243 p. CrossRef
Mair T, Divers T. Equine Internal Medicine. Veterinary selfassessment color review series. Boca Raton: CRC Press; 2015. 399 p. CrossRef
Pogozhykh D, Pakhomova Y, Pervushina O, et al. Exploring the possibility of cryopreservation of feline and canine erythrocytes by rapid freezing with penetrating and non-penetrating cryoprotectants. Stieger K, editor. PLOS ONE. 2017; 12(1): e0169689. [Cited 08.08.2019] Available from: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0169689 CrossRef
Sink C. Practical Transfusion medicine for the small animal practitioner. Jackson: Teton NewMedia, 2004. 110 p.
Ulizko PU, Bobrova OM, Nardid EO, et al. Cryopreservation of animals′ erythrocytes. In: European Research Area: Status, Problems and Prospects. Proceedings of the International Academic Congress; Sept 01–02 2016, Riga, Latvia. Riga; 2016. p. 13–5.
Ulizko PY, Zhegunov GF, Bobrova OM, Zinchenko AV. Influence of mixtures of cryoprotective on safety of cryopreservation of erythrocyte of mammals. Bulletin of problems in biology and medicine. 2011; 3(3): 26-9. Russian.
Won DI, Suh JS. Flow cytometric detection of erythrocyte osmotic fragility. Cytometry Part B: Clin Cytom. 2009;76(2):135-41. CrossRef
Yagi K, Holowaychuk M. Manual of veterinary transfusion medicine and blood banking. Ames: Wiley-Blackwell, 2016. 382 p. CrossRef
Yamamoto A, Saito N, Yamauchi Y, et al. Flow cytometric analysis of red blood cell osmotic fragility. Journal of Laboratory Automation. 2014; 19(5):483-7. [Cited 01.07.2019] Available from: https://journals.sagepub.com/home/jla CrossRef
Zemlianskykh NG, Kovalenko IF, Babijchuk LA. Peculiarities of modifications in geometric parameters and changes in osmotic fragility of human erythrocytes following their exposure in sucrose and PEG-1500 Solutions. Problems of Cryobiology and Cryomedicine. 2017; 27(4): 296-310. CrossRef
Zubov PM. Altered lipid asymmetry of membranes of red blood cells of cord and donor blood under Cryopreservation with PEG-1500. Bulletin of problems in biology and medicine. 2013; 2(2): 109-112. Russian.
Downloads
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
