Антиоксидант глутатіон підвищує стійкість ядровмісних клітин кордової крові під час кріоконсервування з диметилсульфоксидом
DOI:
https://doi.org/10.15407/cryo30.01.058Ключові слова:
кордова кров людини, ÑдровміÑні клітини, кріоконÑервуваннÑ, диметилÑульфокÑид, активні форми киÑню, глутатіонАнотація
Проведено комплексну оцінку ефективності кріоконсервування ядровмісних (ЯВК), зокрема гемопоетичних прогеніторних (ГПК), клітин кордової крові (КК), у захисних сумішах, які містять проникальний кріопротектор диметил-сульфоксид (ДМСО) та антиоксидант глутатіон у різних концентраціях, одразу після розморожування та наступного пе-ренесення до умов, які моделюють фізіологічні in vitro. Застосування 1 та 3 мМ глутатіону у кріозахисному середовищі з 7,5 та 10% ДМСО дозволяє зберегти 85,9% життєздатних ЯВК і 91,2% ГПК відразу після розморожування та 75–80% життєздатних ЯВК/ГПК після годинної інкубації в розчині Хенкса, що перевищує контрольні значення без додавання антиоксиданта. При цьому збереженість та життєздатність ЯВК та ГПК після кріоконсервування у розчинах із 5% ДМСО та 1 і 3 мМ глутатіону були на рівні (або навіть перевищували їх) отриманих із 7,5 і 10% ДМСО без застосування антиокси-данта. Встановлено, що кріоконсервування ЯВК у розчинах, які містять глутатіон, знижує кількість DCF+-клітин. Комбінація 7,5% ДМСО та 1 або 3 мМ глутатіону зменшує кількість клітин із надлишковим вмістом активних форм кисню із 19% (у зразках без додавання глутатіону) до 11% (у зразках із глутатіоном), навіть після перенесення до умов, які моделюють фізіологічні in vitro.
Probl Cryobiol Cryomed 2020; 30(1): 058–067
Посилання
Abdulkadyrov KM, Romanenko NA, Selyvanov EA. [Our experience in the preparation, testing and storage of cord blood hematopoietic cells]. Cell Transplantation and Tissue Engineering. 2006; 3(1): 63-5. Russian.
Chen G, Yue A, Ruan Z, et al. Comparison of the effects of different cryoprotectants on stem cells from umbilical cord blood. Stem Cells Int [Internet]. 2016 [cited 2019 March 10]; 2016: 1396783-89. Available from: https://www.hindawi.com/journals/sci/2016/1396783/
Davis JM, editor. Basic cell culture. A practical approach. Oxford: Oxford University Press; 2002. 382 p.
De Ménorval MA, Mir LM, Fernández ML, Reigada R. Effects of dimethyl sulfoxide in cholesterol-containing lipid membranes: а comparative study of experiments in silico and with cells. PLoS One [Internet]. 2012 Jul 25 [cited 2019 March 10];7(7):e41733. Available from: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0041733 CrossRef
Forman HJ. Glutathione - from antioxidant to post-translational modifier. Arch Biochem Biophys. 2016;595:64-7. CrossRef
Gardner SG, Raina JB, Ralph PJ, Petrou K. Reactive oxygen species (ROS) and dimethylated sulphur compounds in coral explants under acute thermal stress. J Exp Biol. 2017;220(Pt 10):1787-91. CrossRef
Kadekar D, Rangole S, Kale V, Limaye L. Conditioned medium from placental mesenchymal stem cells reduces oxidative stress during the cryopreservation of Ex Vivo expanded umbilical cord blood cells. PLoS One [Internet]. 2016 Oct 25 [cited 2019 March 10];11(10):e0165466. Available from: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0165466. CrossRef
Mantri S, Kanungo S, Mohapatra PC. Cryoprotective effect of disaccharides on cord blood stem cells with minimal use of DMSO. Indian J Hematol Blood Transfus. 2015;31(2):206-12. CrossRef
Roura S, Pujal J-M, Gálvez-Montón C, Bayes-Genis A. The role and potential of umbilical cord blood in an era of new therapies: a review. Stem Cell Res Ther. 2015; 6(1): 123-8. CrossRef
Scott KL, Lecal J, Acker JP. Biopreservation of red blood cells: past, present and future. Transfus Med Rev. 2005;19(2):127-42. CrossRef
Setyawan EMN, Kim MJ, Oh HJ, et al. Spermine reduces reactive oxygen species levels and decreases cryocapacitation in canine sperm cryopreservation. Biochem Biophys Res Commun. 2016;479(4):927-32. CrossRef
Sutherland DR, Anderson L, Keeney M, et al. The ISHAGE guidelines for CD34+ cell determination by flow cytometry. International Society of Hematotherapy and Graft Engineering. J Hematother. 1996;5(3):213-26. CrossRef
Vakifahmetoglu-Norberg H, Ouchida AT, Norberg E. The role of mitochondria in metabolism and cell death. Biochem Biophys Res Commun. 2017;482(3):426-31. CrossRef
Wardman P. Fluorescent and luminescent probes for measurement of oxidative and nitrosative species in cells and tissues: progress, pitfalls, and prospects. Free Radic Biol Med. 2007;43(7):995-1022. CrossRef
Zembruski NC, Stache V, Haefeli WE, Weiss J. 7-Aminoactinomycin D for apoptosis staining in flow cytometry. Anal Biochem. 2012;429(1):79-81. CrossRef
Zimmermann M, Meyer N. Annexin V/7-AAD staining in keratinocytes. Methods Mol Biol. 2011;740:57-63. CrossRef
Downloads
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Авторське право (c) 2020 Olena Makashova, Olga Mykhailova, Oksana Zubova, Pavlo Zubov, Lubov Babijchuk
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
