Вплив режиму заморожування на збереження еритроцитів собаки за використання диметилсульфоксиду
Ключові слова:
кріоконсервування, кріопротектор, еритроцити собаки, диметилсульфоксид, режими заморожуванняАнотація
У роботі досліджено вплив концентрації диметилсульфоксиду (ДМСО) та різних режимів заморожування на збереження еритроцитів собаки в умовах кріоконсервування. Рівень гемолізу еритроцитів визначали після їх відтавання та на кожному етапі відмивання від кріопротектора. Показано, що збільшення концентрації ДМСО з 7,5 до 10 % дозволяє знизити рівень гемолізу еритроцитів собаки безпосередньо після заморожування-відтавання більш ніж у два рази. Під час відмивання від кріопротектора рівень пошкодження еритроцитів, заморожених із концентрацією ДМСО 7,5 та 10 %, значуще не відрізнявся. Встановлено, що рівень загального гемолізу еритроцитів після заморожування-відтавання суттєво варіює залежно від обраного режиму охолодження. Найбільше ушкодження клітин спостерігається за умов заморожування в парах азоту з подальшим зануренням у рідкий азот (73 %). Заморожування шляхом безпосереднього занурення зразка у рідкий азот дозволяє знизити гемоліз до 37 %. Найбільш ефективним виявився режим заморожування з попереднім зануренням нижньої частини кріопробірки у рідкий азот перед її повним заморожуванням (31 %). Такий підхід забезпечує ініціацію кристалоутворення в нижній частині кріопробірки, що значно знижує ризик механічного пошкодження клітин у процесі формування кристалічної структури льоду.
Probl Cryobiol Cryomed. 2026; 36(2): 115—121
Посилання
Bala DA, Eraslan E, Akyazi I, et al. Freezing and storage of leukodepleted erythrocyte suspensions. Vet Med - Czech. 2016; 61(8): 443-8. CrossRef
Bala DA, Özcan M. The effects of freezing on long-term storage of canine erythrocytes. Pol J Vet Sci. 2016; 19(2): 401-6. CrossRef
Bogner P, Csutora P, Cameron IL, et al. Augmented water binding and low cellular water content in erythrocytes of camel and camelids. Biophys J. 1998; 75(6): 3085-91. CrossRef
Denisova ON, Zhegunov GF, Babijchuk LA. Cryopreservation of animal's erythrocytes under dimethyl sulfoxide, polyethylene oxide and glycerol protection. Problems of Cryobiology. 2005; 15 (2): 195-201. Full Text
Denysova OM, Yakymenko TI, Vashchenko VV, et al. [Modern ideas about methods of cryopreservation of animal erythrocytes.] Veterinary Science, Technologies of Animal Husbandry and Nature Management. 2018; (2): 65-9. Ukrainian. CrossRef
Denysova OM, Zhegunov GF. Cryopreservation of canine erythrocytes using dimethyl sulfoxide, polyethylene glycol and sucrose. Probl Cryobiol Cryomed. 2021; 31(1): 38-50. CrossRef
Denysova OM, Zhegunov GF, Zemlianskykh NG. [Resistance of erythrocytes of animals against the influence of low temperatures]. Naukovyi Vіsnyk Natsіonalnogo Agrarnogo Unіversytetu. 2008; 126: 67-5. Ukrainian.
Kim H, Itamoto K, Une S, et al. Application of phosphoenolpyruvate into canine red blood cell cryopreservation with hydroxyethyl starch. CryoLetters. 2005; 26 (1):1-6. CrossRef
Kim H, Tanaka S, Une S, et al. A comparative study of the effects of glycerol and hydroxyethyl starch in canine red blood cell cryopreservation. J Vet Med Sci. 2004; 66 (12): 1543-7. CrossRef
Langer R, Albrecht R, Hempel K, et al. Characterization of 24-hour survival rate and duration of survival of hydroxyethyl starch cryopreserved erythrocytes after autologous transfusion in the dog. Infusionsther Transfusionsmed. 1994; 21 (6): 393-400. PubMed
Liu J, Christian JA, Critser JK. Canine RBC osmotic tolerance and membrane permeability. Cryobiology. 2002; 44(3): 258-68. CrossRef
Pogozhykh D, Pakhomova Y, Pervushina O, et al. Exploring the possibility of cryopreservation of feline and canine erythrocytes by rapid freezing with penetrating and non-penetrating cryoprotectants. PLoS ONE [Internet]. 2017 Jan 10 [cited 2025 Sept 5]; 12(1): e0169689. Available from: https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0169689 CrossRef
Ulizko PY, Zhegunov GF, Denisova ON. Influence of freeze-thawing with DMSO on integrity and osmotic fragility of erythrocyte from different mammalian species. Problems of Cryobiology. 2011; 21(1): 52-7. Full Text
Valeri CR, Srey R, Tilahun D, et al. The in vitro quality of red blood cells frozen with 40 percent (wt/vol) glycerol at -80 degrees C for 14 years, deglycerolized with the Haemonetics ACP 215, and stored at 4 degrees C in additive solution-1 or additive solution-3 for up to 3 weeks. Transfusion. 2004; 44: 990-5. CrossRef
Wagner CT, Martowicz ML, Livesey SA, et al. Biochemical stabilization enhances red blood cell recovery and stability following cryopreservation. Cryobiology. 2002; 45: 153-66. CrossRef
Zhegunov GF, Denysova ON. [Permeability of mammalian erythrocytes for the molecules of glycerol and DMSO and the level of cellular viability after freezing-thawing]. Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine. 2010; (12): 139-43. Russian.
Zhegunov GF, Denysova ON, Zemlianskykh NG. [Cryopreservation and integrity of animal erythrocytes]. Problems of Cryobiology. 2005; 15(3): 566-9. Russian. Full Text
Zhegunov GF, Denysova ON, Zhegunova GP. Blood hypothermic storage and erythrocyte cryopreservation in dogs. Probl Cryobiol Cryomed. 2022; 32(4): 245-55. CrossRef
Zhegunov GF, Nardid OA, editors. [Fundamentals of cryobiology and cryomedicine]. Kharkiv: Brovin AB; 2019. 616 p. Russian.
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див. The Effect of Open Access).
