Кріоконсервування культури клітин L929 у захисних розчинах із вмістом гіалуронової кислоти

Анотація

Останнім часом у кріобіологічних дослідженнях приділяється увага перспективності використання гіалуронової кислоти (ГК) як компонента захисних середовищ під час кріоконсервування різного типу клітин. ГК є полісахаридом природного походження і невід’ємною складовою позаклітинного матриксу, що обумовлює її високу біосумісність та потенційні захисні властивості щодо клітин у стресових умовах, зокрема під час заморожування. У роботі наведено результати кріоконсервування клітин L929 з використанням захисних розчинів з вмістом 0,5 % ГК різної молекулярної маси та 5 % класичного ендоцелюлярного кріопротектора ДМСО. Експериментальні протоколи заморожування клітин відрізнялися складом кріозахисного розчину, способом додавання його складових до клітин та тривалістю експозиції клітин. Ефективність застосованих протоколів кріоконсервування оцінювали за показниками життєздатності клітин L929 та їх адгезивних властивостей. Отримані результати показали, що ГК незалежно від її молекулярної маси не впливає на проникнення ДМСО крізь мембрани клітин L929. Використання кріозахисного розчину, який містив лише низькомолекулярну ГК, забезпечувало збереженість клітин на рівні (72 ± 4,2) %, що не відрізнялося від показників для стандартного протоколу. Для високомолекулярної ГК цей показник знижувався до (42 ± 4,8) %. Незалежно від протоколу кріоконсервування клітини L929 зберігали здатність до прикріплення до адгезивної поверхні. Проте подальший ріст та проліферація клітин значною мірою залежали від складу кріозахисного розчину та умов введення його компонентів. Таким чином, показано, що як низькомолекулярна ГК, так і високомолекулярна ГК проявляють виражені кріозахисні властивості і можуть використовуватися як складові захисних середовищ у поєднанні з ДМСО або як самостійний непроникний кріопротектор.

Probl Cryobiol Cryomed. 2026; 36(1): 27—31